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酶联免疫反应常用底物

来源:哗拓教育
酶联免疫反应常用底物 辣根过氧化物酶 HRP底物

辣根过氧化物酶 (Horseradish Peroxidase, HRP具有分子量小,标记方法简单,性质稳定等优点,是临 床检验试剂中常用的酶。该产品广泛用于各类生化检测项目及免疫类( 氧化物酶的底物种类丰富,可满足不同的实验需求。

ELISA)试剂盒。中华试剂网辣根过

■ HRP的发色底物

辣根过氧化物酶发色底物为过氧化物和供氢体(

DH2,其真正底物是HLQ,但人们习惯把供氢体称为底物

或统称供氢体底物。在 ELISA中常用的供氢体有以下几种:

1、 OPD是 ELISA技术中应用较多的供氢体,酶作用后显黄色(最大吸收波长为

便。

492 nm),其灵敏度高,测 定方

2、 TMB是近年来常用的一种供氢底物,经酶作用后显天蓝色,目测对比度鲜明,加酸终止酶反应后变黄色

(最大吸收波长为450 nm),易比色定量测定。

3、 DBA供氢底物,其反应产物为不能溶解的棕色吩嗪衍生物,可用不同光镜观察。此种多聚物能被还原和

螯合四氯化碳,形成具有电子密度的产物,便于用电镜观察。 反应产 中文名称 英文名称 物 包 CAS 装 100 黄色、可 邻苯二胺 g 95-54-5 500 g o-Phenylenediamine, OPD, 99.5% 溶性 3,3',5,5'-四 3,3',5,5'-Tetramethylbenzidine, TMB, 99% 甲基联苯胺 蓝色(黄 色)、可 54827-17-7 溶性 1 g 5 g 25 3,3'-二氨基联 苯胺 棕色、不 g 91-95-2 100 g 3,3'-Diaminobenzidine, DAB, 99% 溶性 联苯胺 Benzidine, 95% 蓝色、不 溶性 25 g 92-87-5 250 g 四甲基联苯胺 硫酸盐 N-(3-Sulfopropyl)-3,3',5,5-tetramethylbenzidine,sodium salt, TMB-PS, 99% 5 g 蓝色、可 溶性 102062-36-2 25 g 25 g 棕色、可 100 89-57-6 g 500 g 5-氨基水杨酸 5-Aminosalicylic acid, 98.5% 溶性 2,2'-二氮-双 (3-乙基苯并噻 Azinobis(3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid-2NH 4-salt 绿色、可 溶性 30931-67-0 1 g

唑-6-磺酸)铵 盐 5 g 3-氨基-9-乙基 咔唑 3-Amino-9-ethylcarbazole, AEC 红色、可 溶性 132-32-1 25 g 4-氯-1萘酚 Chloro-1-naphthol 蓝色、可 溶性 604-44-4 25 g 探小贴士:氧化物、硫化物、氟化物及叠氮化物等可抑制 HRP的活性,故勿用这类试剂作为防腐剂

■ HRP的发光底物

鲁米诺(3-氨基邻苯二甲酰肼,Luminol )或其衍生物如异鲁米诺(4-氨基邻苯二甲酰肼,Isoluminol ),

是一类重要的发光试剂。用 HRP标记抗体,进行免疫反应后,利用鲁米诺作为发光底物,在 光试剂(NaOH+HO)作用下,鲁米诺发光,发光强度依赖于酶免疫反应物中酶的浓度。

HRP和起动发

反应过程如下图所示:

洗涤渚除沪

+ +

抗怀包彼

固相我体

抗原 掠朦体

双抗体夹心复合物

H:Oa

♦XE + V +

取抗体夹心复合物増强剤書米诺

产品编号

中文名称

英文名称

% ♦注靡W +

HiO I 鲁米诺发光

CAS

纯度

包装

1 g

328061

鲁米诺

Luminol 521-31-3 98%

5 g 25 g

分子式:CsHNQ 分子量:433.63 熔点:194-195 °C 储存条件:2-8 ° C

产品编号 中文名称 异鲁米诺

英文名称 CAS号 3682-14-2

纯度 包装

A5300 Isoluminol 98%

1 g 10 g

分子式:GH7NO 分子量:177.16

熔点:194-195 °C 储存条件:2-8 ° C

■配套产品

中文名称 英文名称 CAS号 纯度 包装 5 g 4-碘苯酚 4-Iodophenol 540-38-5 99% 25 g 100 g 25 g 四苯基硼酸钠 Sodium tetraphenylborate 143-66-8 99.5%(ACS) 100 g 500 g 5 g 牛血清白蛋白 Bovine serum albumin [ Fraction V], BSA 9048-46-8 — 99% 25 g 100 g 100 g 500 g 25 g 十二烷基硫酸钠 Dodecyl sulfate sodium salt, SDS 151-21-3 脱氧胆酸钠 Sodium deoxycholate 302-95-4 98% 100 g 500 g 苯甲基磺酰氟化物 Phenylmethylsulfonyl fluoride, PMSF 329-98-6 99% 25 g 100 g 10 mg 50 mg 25 g 亮抑酶肽 Leupeptin 103476-89-7 96.5% 三(羟甲基)氨基甲 烷盐酸盐 Tris(hydroxymethyl)aminomethane hydrochloride, Tris-HCl 1185-53-1 99% 100 g 500 g 吐温80 Polysorbate 80 9005-65-6 — 250 mL 1 L 碱性磷酸酶底物 碱性磷酸酶(Alkaline phospharase, AP)

是一种能够在碱性情况下将对应底物去磷酸化的酶,广泛分布于

人体的各脏器器官中,以肝脏、骨骼、小肠中存在的量最多。其含量的变化能引起肝炎、肝癌等疾病,是 目前免疫诊断试剂产品最常用的标记酶之一。

PNPP(p-Nitrophenyl phosphate disodium salt

后,形成黄色水溶性反应产物,其在

生产中得到广泛应用。

)是常用的碱性磷酸酶底物,当碱性磷酸酶与 PNPP反应

&ambda= 405 nm有光吸收。其反应灵敏,颜色鲜明,在诊断试剂盒

■ PNPP

产品编号 中文名称 英文名称 CAS 333338-18-4 包装 254303 4-硝基苯磷酸二钠盐六水合 p-Nitrophenyl phosphate disodium 1 g 物 hexahydrate, 98% 5 g 25 g 分子式:GHNNaOP • 6H2Q O 分子量:371.14 鼻*”0 P OWa - GH^O 熔 点:>300 ° C 4脈 储存条件:2-8 ° C BCIP和NBT是碱性磷酸酶最佳的发色底物组合之一,产物为深蓝色。 在碱性磷酸酯酶的催化下,BCIP会被

水解产生强反应性的产物,该产物会和 NBT发生反应,形成不溶性的深蓝色至蓝紫色的 NBT-formazan,从

而达到标记作用

BCIP

■ BCIP 产品编号

H

&

2H

\\ H O

indigo dye

N

J $

-N'N

N-N

NM*N *2

厂r

N'N CH3O

Fofivd^ari

OCH

中文名称 英文名称 CAS

包装

5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸酯对

338560

甲苯胺盐

分子式:GHBrCINQP • C7HN

分子量:433.63 熔 点:194-195 °C

储存条件:2-8 ° C

■ NBT 产品编号 中文名称 577118 氯化硝基四氮唑兰 分子式:C40H50N10Q • 2Cl 分子量:817.64 熔点:200 ° C 储存条件:2-8 ° C ■其它底物

产品编号I中文名称

5-Bromo-4-chloro-3-indolyl phosphate p-toluidine salt, BCIP, 98%

6578-06-9

100 mg 250 mg

1 g

英文名称 CAS 298-83-9 包装 Nitrotetrazolium Blue chloride, NBT, 90% 100 mg 1 g (10: Q Cl OCH(J 心* 英文名称 终颜色及水溶性 CAS 包装

1084029 4-硝基苯磷酸 二钠 萘酚AS-BI磷 酸盐 萘酚-AS-MX-磷 Disodium 4-nitrophenylphosphate, 99% Naphthol AS-BI phosphate, NABP, 95% Naphthol-AS-MX-phosphate, NAMP, 99% 黄色、可溶性 4264-83-9 Inquire 100 mg 209946 红色、不溶性 1919-91-1 500 mg 1 g 3000201 红色、不溶性 1596-56-1 250 mg 酸盐 ■配套产品

产品编号 中文名称 英文名称 CAS 包装 5-Bromo-4-chloro-3-indoxyl phosphate, 141887 5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸二钠盐 disodium salt sesquihydrate 102185-33-1 100 mg 250 mg 100 mg 250 mg 500 mg 5 g 1 g 5 g 1 g 5 g 1 g BIB1419 5-溴-6-氯-3-吲哚磷酸二钠盐 5-Bromo-6-chloro-3-indoxyl phosphate, disodium salt monohydrate 404366-59-2 I655000 3-吲哚酰磷酸酯二钠盐 3-Indoxyl phosphate, disodium salt 3318-43 -2 4-Methylumbelliferyl phosphate, free acid Phenolphthalein monophosphate, 565360 4-甲基伞形酮磷酸酯 3368-04-5 272074 M04138 酚酞磷酸双环己烷铵盐 环己基溴化镁 bis(cyclohexylammonium) salt Bis(4-methylumbelliferyl)phosphate 51379-C 14815-59-9 7-8

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