一种除臭微生物菌剂的制备方法[发明专利]

(12)发明专利申请

(10)申请公布号 CN 106967640 A(43)申请公布日 2017.07.21

(21)申请号 201710231159.8(22)申请日 2017.04.11

(71)申请人 上海莱泰生物科技有限公司

地址 201914 上海市崇明县横沙乡富民支

路58号2346室（上海横泰经济开发区）(72)发明人 徐苏愉　(51)Int.Cl.

C12N 1/20(2006.01)B01D 53/84(2006.01)A61L 9/01(2006.01)C12R 1/40(2006.01)C12R 1/37(2006.01)C12R 1/085(2006.01)A61L 101/52(2006.01)

权利要求书1页 说明书4页

(54)发明名称

一种除臭微生物菌剂的制备方法

(57)摘要

本发明公开了一种除臭微生物菌剂的制备方法，属于除臭剂领域。包括以下步骤：（1）复合菌种的配制；（2）培养基的配制；（3）复合菌剂原液的制备；（4）发酵原液的制备；（5）除臭微生物菌剂的生成。通过多种菌种复合除臭，多菌种相互配合、综合治理恶臭，能够达到比单菌种更好的除臭效果。

CN 106967640 ACN 106967640 A

权　利　要　求　书

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1.一种除臭微生物菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）复合菌种的配制：将活化后的恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)、凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)、蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)和水配制成复合菌种，所述复合菌种中恶臭假单胞菌含量占25～30wt%、凝结芽孢杆菌含量占20～30wt%、蜡状芽孢杆菌含量占10～20wt%，余量为水；（2）培养基的配制：将蛋白胨、葡萄糖、麦芽糖和水混合配制成培养基；（3）复合菌剂原液的制备：将步骤（1）的复合菌种接种到步骤（2）的培养基中，其中复合菌种与培养基的重量配比范围为1:99～10:90，在37℃条件下，摇床培养24h，得到复合菌剂原液；（4）发酵原液的制备：准备糖蜜和维生素溶液，将糖蜜在121℃条件下灭菌20min，维生素溶液由维生素H、维生素B12和水组成，将维生素溶液在110℃条件下灭菌15min，将糖蜜、维生素溶液、以及步骤（3）的复合菌剂原液和水配制成发酵原液，所述发酵原液中糖蜜含量为25wt%，维生素溶液含量为0.2wt%，复合菌剂原液含量为20～30wt%，余量为水；（5）除臭微生物菌剂的生成：将密封发酵罐灭菌20min，将步骤（4）的发酵原液放入5吨装密封发酵罐中，在30℃条件下发酵7天得到除臭微生物菌剂。

2.根据权利要求1所述一种除臭微生物菌剂的制备方法，其特征在于：所述培养基中蛋白胨含量为0.8wt%、葡萄糖含量为1wt%、麦芽糖含量为0.5wt%，余量为水。

3.根据权利要求1所述一种除臭微生物菌剂的制备方法，其特征在于：所述维生素溶液中维生素H含量为2wt%、维生素B12含量为12wt%，余量为水。

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一种除臭微生物菌剂的制备方法

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技术领域[0001]本发明涉及一种除臭微生物菌剂的制备方法，属于除臭剂领域。

背景技术[0002]我国城市生活垃圾年清运量约为2亿吨，除了少部分焚烧、堆肥或回收利用外，其余70%以上被运送到填埋场进行处置。垃圾在填埋场的堆放、装卸、平铺、压实等过程中，因为有机物的腐烂分解，不可避免地将产生恶臭污染。恶臭气体按其组分主要可分成5类：①含硫化合物，如H2S、SO2、硫醇、硫醚等；②含氮化合物，如氨气、胺类等；③卤素及衍生物，如卤代烃等；④烃类及芳香烃；⑤含氧有机物，如醇、酚、醛、酮、有机酸等。恶臭既会严重危害人体健康，又将产生二次污染。目前，对于填埋场中的垃圾，亟需一种能够去除恶臭污染的除臭剂。

发明内容[0003]本发明所要解决的技术问题在于：提供一种除臭微生物菌剂的制备方法，它能够制备出一种高效的除臭微生物菌剂，解决了有机物垃圾腐烂分解时产生恶臭的问题。[0004]本发明所要解决的技术问题采取以下技术方案来实现：

一种除臭微生物菌剂的制备方法，包括以下步骤：（1）复合菌种的配制：将活化后的恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)、凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)、蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)和水配制成复合菌种，所述复合菌种中恶臭假单胞菌含量占25～30wt%、凝结芽孢杆菌含量占20～30wt%、蜡状芽孢杆菌含量占10～20wt%，余量为水；

（2）培养基的配制：将蛋白胨、葡萄糖、麦芽糖和水混合配制成培养基；（3）复合菌剂原液的制备：将步骤（1）的复合菌种接种到步骤（2）的培养基中，其中复合菌种与培养基的重量配比范围为1:99～10:90，在37℃条件下，摇床培养24h，得到复合菌剂原液；

（4）发酵原液的制备：准备糖蜜和维生素溶液，将糖蜜在121℃条件下灭菌20min，维生素溶液由维生素H、维生素B12和水组成，将维生素溶液在110℃条件下灭菌15min，将糖蜜、维生素溶液、以及步骤（3）的复合菌剂原液和水配制成发酵原液，所述发酵原液中糖蜜含量为25wt%，维生素溶液含量为0.2wt%，复合菌剂原液含量为20～30wt%，余量为水；

（5）除臭微生物菌剂的生成：将密封发酵罐灭菌20min，将步骤（4）的发酵原液放入5吨装密封发酵罐中，在30℃条件下发酵7天得到除臭微生物菌剂。[0005]作为优选实例，所述培养基中蛋白胨含量为0.8wt%、葡萄糖含量为1wt%、麦芽糖含量为0.5wt%，余量为水。[0006]作为优选实例，所述维生素溶液中维生素H含量为2wt%、维生素B12含量为12wt%，余量为水。[0007]本发明的有益效果是：

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(1)恶臭假单胞菌用于降解苯酚等环境污染物；(2)凝结芽孢杆菌在代谢过程中生成乳酸，用于降解环境中的氨气、硫化氢等有害气体，并能有效抑制有害菌的生长，在垃圾堆体中生成不利于腐败菌生长的弱酸环境；

(3)蜡状芽孢杆菌产生多种酶类、乳酸、丙酸、乙酸等物质，抑制了大肠杆菌对蛋白质的分解以及大肠杆菌的生长，从而降低氨和胺的浓度，改善环境；

（4）通过多种菌种复合除臭，多菌种相互配合、综合治理恶臭，能够达到比单菌种更好的除臭效果。

具体实施方式[0008]为了对本发明的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合实施例，进一步阐述本发明。[0009]一种除臭微生物菌剂的制备方法，包括以下步骤：

（1）复合菌种的配制：将活化后的恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)、凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)、蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)和水配制成复合菌种，复合菌种中恶臭假单胞菌含量占25～30wt%、凝结芽孢杆菌含量占20～30wt%、蜡状芽孢杆菌含量占10～20wt%，余量为水；

（2）培养基的配制：将蛋白胨、葡萄糖、麦芽糖和水混合配制成培养基，培养基中蛋白胨含量为0.8wt%、葡萄糖含量为1wt%、麦芽糖含量为0.5wt%，余量为水；

（3）复合菌剂原液的制备：将步骤（1）的复合菌种接种到步骤（2）的培养基中，其中复合菌种与培养基的重量配比范围为1:99～10:90，在37℃条件下，摇床培养24h，得到复合菌剂原液；

（4）发酵原液的制备：准备糖蜜和维生素溶液，将糖蜜在121℃条件下灭菌20min，维生素溶液由维生素H、维生素B12和水组成，维生素溶液中维生素H含量为2wt%、维生素B12含量为12wt%，余量为水，将维生素溶液在110℃条件下灭菌15min，将糖蜜、维生素溶液、以及步骤（3）的复合菌剂原液和水配制成发酵原液，发酵原液中糖蜜含量为25wt%，维生素溶液含量为0.2wt%，复合菌剂原液含量为20～30wt%，余量为水；

（5）除臭微生物菌剂的生成：将密封发酵罐灭菌20min，将步骤（4）的发酵原液放入5吨装密封发酵罐中，在30℃条件下发酵7天得到除臭微生物菌剂。[0010]上述恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)、凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)、蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)由中国普通微生物菌种保藏管理中心保藏，菌种编号分别为1.3096、1.3220、1.3760。[0011]实施例1

一种除臭微生物菌剂的制备方法，包括以下步骤：（1）复合菌种的配制：将活化后的恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)、凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)、蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)和水配制成复合菌种，复合菌种中恶臭假单胞菌含量占25wt%、凝结芽孢杆菌含量占20wt%、蜡状芽孢杆菌含量占10wt%，余量为水；

（2）培养基的配制：将蛋白胨、葡萄糖、麦芽糖和水混合配制成培养基，培养基中蛋白胨含量为0.8wt%、葡萄糖含量为1wt%、麦芽糖含量为0.5wt%，余量为水；

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（3）复合菌剂原液的制备：将步骤（1）的复合菌种接种到步骤（2）的培养基中，其中复合菌种与培养基的重量配比为10:90，在37℃条件下，摇床培养24h，得到复合菌剂原液；

（4）发酵原液的制备：准备糖蜜和维生素溶液，将糖蜜在121℃条件下灭菌20min，维生素溶液由维生素H、维生素B12和水组成，维生素溶液中维生素H含量为2wt%、维生素B12含量为12wt%，余量为水，将维生素溶液在110℃条件下灭菌15min，将糖蜜、维生素溶液、以及步骤（3）的复合菌剂原液和水配制成发酵原液，发酵原液中糖蜜含量为25wt%，维生素溶液含量为0.2wt%，复合菌剂原液含量为30wt%，余量为水；

（5）除臭微生物菌剂的生成：将密封发酵罐灭菌20min，将步骤（4）的发酵原液放入5吨装密封发酵罐中，在30℃条件下发酵7天得到除臭微生物菌剂。[0012]按照实施例1制备而成的除臭微生物菌剂，它的除臭效果检测如下：

在填埋场选取重量1吨的垃圾堆，先检测未经除臭的垃圾堆体臭气浓度，然后以1:30稀释比例稀释微生物除臭菌剂原液0.8公斤，得到除臭菌剂稀释液24公斤，将24公斤稀释液均匀喷洒入垃圾堆体中，经半小时后检测除臭效果。[0013]经第三方检测机构——SGS通标标准技术服务有限公司检测：喷洒微生物除臭菌剂后，臭气浓度由486下降到60。[0014]实施例2

一种除臭微生物菌剂的制备方法，包括以下步骤：（1）复合菌种的配制：将活化后的恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)、凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)、蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)和水配制成复合菌种，复合菌种中恶臭假单胞菌含量占28wt%、凝结芽孢杆菌含量占25wt%、蜡状芽孢杆菌含量占15wt%，余量为水；

（2）培养基的配制：将蛋白胨、葡萄糖、麦芽糖和水混合配制成培养基，培养基中蛋白胨含量为0.8wt%、葡萄糖含量为1wt%、麦芽糖含量为0.5wt%，余量为水；

（3）复合菌剂原液的制备：将步骤（1）的复合菌种接种到步骤（2）的培养基中，其中复合菌种与培养基的重量配比为5:95，在37℃条件下，摇床培养24h，得到复合菌剂原液；

（4）发酵原液的制备：准备糖蜜和维生素溶液，将糖蜜在121℃条件下灭菌20min，维生素溶液由维生素H、维生素B12和水组成，维生素溶液中维生素H含量为2wt%、维生素B12含量为12wt%，余量为水，将维生素溶液在110℃条件下灭菌15min，将糖蜜、维生素溶液、以及步骤（3）的复合菌剂原液和水配制成发酵原液，发酵原液中糖蜜含量为25wt%，维生素溶液含量为0.2wt%，复合菌剂原液含量为25wt%，余量为水；

（5）除臭微生物菌剂的生成：将密封发酵罐灭菌20min，将步骤（4）的发酵原液放入5吨装密封发酵罐中，在30℃条件下发酵7天得到除臭微生物菌剂。[0015]按照实施例2制备而成的除臭微生物菌剂，它的除臭效果检测如下：

在填埋场选取重量1吨的垃圾堆，先检测未经除臭的垃圾堆体臭气浓度，然后以1:30稀释比例稀释微生物除臭菌剂原液0.8公斤，得到除臭菌剂稀释液24公斤，将24公斤稀释液均匀喷洒入垃圾堆体中，经半小时后检测除臭效果。[0016]经第三方检测机构——SGS通标标准技术服务有限公司检测：喷洒微生物除臭菌剂后，臭气浓度由483下降到59。[0017]实施例3

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一种除臭微生物菌剂的制备方法，包括以下步骤：（1）复合菌种的配制：将活化后的恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)、凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)、蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)和水配制成复合菌种，复合菌种中恶臭假单胞菌含量占30wt%、凝结芽孢杆菌含量占30wt%、蜡状芽孢杆菌含量占20wt%，余量为水；

（2）培养基的配制：将蛋白胨、葡萄糖、麦芽糖和水混合配制成培养基，培养基中蛋白胨含量为0.8wt%、葡萄糖含量为1wt%、麦芽糖含量为0.5wt%，余量为水；

（3）复合菌剂原液的制备：将步骤（1）的复合菌种接种到步骤（2）的培养基中，其中复合菌种与培养基的重量配比为2:98，在37℃条件下，摇床培养24h，得到复合菌剂原液；

（4）发酵原液的制备：准备糖蜜和维生素溶液，将糖蜜在121℃条件下灭菌20min，维生素溶液由维生素H、维生素B12和水组成，维生素溶液中维生素H含量为2wt%、维生素B12含量为12wt%，余量为水，将维生素溶液在110℃条件下灭菌15min，将糖蜜、维生素溶液、以及步骤（3）的复合菌剂原液和水配制成发酵原液，发酵原液中糖蜜含量为25wt%，维生素溶液含量为0.2wt%，复合菌剂原液含量为30wt%，余量为水；

（5）除臭微生物菌剂的生成：将密封发酵罐灭菌20min，将步骤（4）的发酵原液放入5吨装密封发酵罐中，在30℃条件下发酵7天得到除臭微生物菌剂。[0018]按照实施例3制备而成的除臭微生物菌剂，它的除臭效果检测如下：

在填埋场选取重量1吨的垃圾堆，先检测未经除臭的垃圾堆体臭气浓度，然后以1:30稀释比例稀释微生物除臭菌剂原液0.8公斤，得到除臭菌剂稀释液24公斤，将24公斤稀释液均匀喷洒入垃圾堆体中，经半小时后检测除臭效果。[0019]经第三方检测机构——SGS通标标准技术服务有限公司检测：喷洒微生物除臭菌剂后，臭气浓度由488下降到61。[0020]除臭原理：恶臭假单胞菌用于降解苯酚等环境污染物；凝结芽孢杆菌在代谢过程中生成乳酸，用于降解环境中的氨气、硫化氢等有害气体，并能有效抑制有害菌的生长，在垃圾堆体中生成不利于腐败菌生长的弱酸环境；蜡状芽孢杆菌产生多种酶类、乳酸、丙酸、乙酸等物质，抑制了大肠杆菌对蛋白质的分解以及大肠杆菌的生长，从而降低氨和胺的浓度，改善环境；通过多种菌种复合除臭，多菌种相互配合、综合治理恶臭，能够达到比单菌种更好的除臭效果。[0021]以上显示和描述了本发明的基本原理和主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。

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